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血液中蛋白質(zhì)提取的處理方法

發(fā)布時(shí)間:

2014-08-13


概要:

紅細(xì)胞胞內(nèi)的蛋白提取方法,胞內(nèi)蛋白+膜蛋白提取方法,低速離心機(jī)3000RPM就可以了

紅細(xì)胞胞內(nèi)的蛋白提取方法

用血液抗凝處理,用生理鹽水對(duì)倍稀釋后(也可以用紅細(xì)胞分離液),低速離心機(jī)3000RPM就可以了 ,取出紅細(xì)胞層用低滲溶液裂解紅細(xì)胞,釋放除胞內(nèi)蛋白,你可以用水,凍溶的方法破壞紅細(xì)胞,配方(133mM NH4Cl,10mM NH4HCO3 )你也可以試試,然后離心,分離不溶解的細(xì)胞膜和溶液

胞內(nèi)蛋白+膜蛋白提取方法
如果你要膜蛋白,你可以在上面方法的基礎(chǔ)上,將沉淀的細(xì)胞膜碎片溶解在含有一定表面活性劑的溶液中,利用的是表面活性劑有溶解細(xì)胞膜的特性。當(dāng)然有的表面活性劑溶解后要立刻使用,時(shí)間長(zhǎng)了蛋白可能會(huì)沉淀,有的表面活性劑則沒有此現(xiàn)象

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