驚訝！離心機(jī)在微生物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)中的地位這么高

發(fā)布時(shí)間：

2020-12-26

概要：

離心機(jī)在微生物實(shí)驗(yàn)中得地位多高，可以用這么一句話(huà)來(lái)說(shuō)——沒(méi)用離心機(jī)恐怕完成不了實(shí)驗(yàn)，雖然細(xì)胞碎片清除辦法很多，但是你會(huì)發(fā)現(xiàn)，用離心去除是眾多辦法里面效率最高的！

　　離心機(jī)在微生物實(shí)驗(yàn)中得地位多高，可以用這么一句話(huà)來(lái)說(shuō)——沒(méi)用離心機(jī)恐怕完成不了實(shí)驗(yàn)！

　　比如原代細(xì)胞的提取，有一個(gè)懸浮細(xì)胞的分離方法：

　　1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉(zhuǎn)至離心管中，離心機(jī)1000rpm/分鐘離心5分鐘。

　　2、去掉上清，離心沉淀用無(wú)鈣、鎂的PBS清洗后離心機(jī)1000rpm/分鐘離心5分鐘。此步重復(fù)兩次。

　　3、用培養(yǎng)基重懸，調(diào)整適當(dāng)細(xì)胞濃度后分瓶培養(yǎng)。

　　4、如選用懸液中某種細(xì)胞，可采用離心后的細(xì)胞分層液收獲目的細(xì)胞。

　　再比如細(xì)胞懸液機(jī)械裂解后有很多細(xì)胞碎片，如何去掉這些碎片呢？我們先來(lái)看看各種方法：

　　1.采用稀釋法。細(xì)胞稀釋后還能增殖，會(huì)越來(lái)越多，而細(xì)胞碎片相應(yīng)地會(huì)越來(lái)越少。

　　2.還有自然沉降法。細(xì)胞要比大多數(shù)碎片沉降得快一些：：將細(xì)胞懸液移到離心管中，等細(xì)胞大部分下沉?xí)r，可將上液吸棄，再加入培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，此方法可反復(fù)使用，同時(shí)每次可顯微鏡下觀(guān)察是否符合你的要求。

　　3.低速離心機(jī)可以去除碎片,一般700g,5mins

　　4.離心的時(shí)候，在細(xì)胞數(shù)足夠的條件下，減少離心時(shí)間，如平時(shí)5min，1000rpm，改為3min，1000rpm，去上清，因?yàn)閴乃篮退槠话愣荚谏锨謇?！這樣的操作只需要在孵育前洗滌過(guò)程中操作一次就可以了！

　　雖然細(xì)胞碎片清除辦法很多，但是你會(huì)發(fā)現(xiàn)，用離心去除是眾多辦法里面效率最高的！

　　而且植物組織和細(xì)胞由于具有纖維素、半纖維素和果膠等物質(zhì)組成的細(xì)胞壁，一般需要用石英砂或玻璃粉和適當(dāng)?shù)奶崛∫阂黄鹧心サ姆椒ɑ蛴美w維素酶處理也能達(dá)到目的。細(xì)菌細(xì)胞的破碎比較麻煩，因?yàn)檎麄€(gè)細(xì)菌細(xì)胞壁的骨架實(shí)際上是一個(gè)借共價(jià)鍵連接而成的肽聚糖囊狀大分子，非常堅(jiān)韌。破碎細(xì)菌細(xì)胞壁的常用方法有超聲波破碎，與砂研磨、高壓擠壓或溶菌酶處理等。組織和細(xì)胞破碎后，選擇適當(dāng)?shù)木彌_液把所要的蛋白提取出來(lái)。細(xì)胞碎片等不溶物用離心機(jī)或過(guò)濾的方法除去。

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